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Wet-lab 管理制度

1. 训练&指导

​ 为方便新生尽快熟悉实验室、建立起良好的实验习惯,wet-lab实行老带新的方法。 每一位新加入实验室的Junior student应至少跟随一位senior student学习2个月以上,通过观察学习实验操作规范和技巧。 
期间,senior student需要对所带的学生负责,每天在其实验记录本上签字,认真用心培养。 
根据Junior student的进度,可以从电泳、qPCR、RNA提取等实验开始训练,每个操作的开始两次需要senior student全程陪同并指出错误,规范操作。 对新生的训练不仅限于对其负责的高年级学生,大家应互相帮助,知无不言,共同培养新同学。 


实验室须知

• 参加实验时,不能穿拖鞋、短裤。 


• 不得在实验室储藏食品、饮食、抽烟。 


• 禁止往水槽内倒 入杂物和强酸、强碱及有毒的有机溶剂。 


• 实验室内不允许用电炉烧水、做饭等,生活用 品不能带入实验室。不准在实验室内抽烟,乱丢烟头、火种。 


• 每位实验室工作人员要牢记以下安全规定: 


(1)熟悉所使用的化学物质的特性和潜在危害。

(2)检查设备的性能,充分考虑到使用设备的局限性。

(3)工作中碰到疑问及时请教资深的研究人员或其他专家,不得盲目操作。

• 保持实验台干净整洁、无堆积,每天至少清理一次实验台面,通常在下班前或完成某个特定实验后进行。

2. 实验台分配&配置

1Bench

#1: 少贞、运昕

#2: 思琦、田晨、胡茜

#3: 张尚、红科

注意事项

为保持实验室的整洁、确保实验顺利,大家需养成良好的实验习惯,具体注意事项如下:

• 原则上,每人需在自己的实验台上进行操作; 


• 借用实验台时,请提前与负责人沟通,使用时注意防止交叉污染,并在使用后将实验台恢复原貌; 


• 做实验需穿实验服、戴口罩、戴手套; 


• 实验前,需要提前对超净台紫外灭菌、清点所需试剂并解冻; 


• 实验中,酶需要放在冰/冰盒上,避免vortex,标记清楚实验试剂; 


• 实验后,移液枪调零、整理台面、倾倒废液缸、关闭实验仪器(离心机需开盖以防冷凝); 


• 离开实验室时,检查仪器是否关闭、冰箱门是否紧闭、随手关灯关门。 


2)配置

• 每个实验台的基本配置:6把量程不等的移液枪、1000/200/10ul 枪头各一盒、rack、废液缸; 


• 两台低温离心机,分别置于#2和#3号台一侧; 


• 两个vortex,分别置于#1/#2台中间和#3号台各一个; 


• 两个掌上离心机,置于#1/#2台中间; 


• #1/#2实验台之间的架子:1.5/2ml离心管、8联排管、磁力架、qPCR96孔板、封口膜、笔筒、剪刀; 


• #3实验台架子:rack、离心管架。 


3. RNA超净台注意事项

• 使用工作台时,提前30分钟打开紫外灯照射消毒,处理净化工作区内工作台表面积累的微生物;

• 关闭紫外灯,开启送风机,将超净台罩开启至一半高度;


• 穿着实验服、戴口罩、戴手套;


• 工作台面上,不要存放不必要的物品,以保持工作区内的洁净气流不受干扰;

• 操作时,注意多用酒精和RNase Zap喷洒擦拭双手,所有拿进超净台的物品均需酒精消毒;


• 超净台内的移液枪、枪头、置物架、rack等不可随意拿出超净台;


• 操作结束后,整理工作台面,倾倒废液缸(分类倾倒)并用酒精喷洒,用清洁剂及消毒剂擦拭台面进行消毒;


• 开启工作台紫外灯,照射消毒30分钟后,关闭紫外灯,切断电源;


• 值日生每周对其进行彻底消毒,包括:酒精和RNase Zap擦拭,移液枪、置物架、屏罩等的清理,紫外消毒


4. 实验室冰箱

实验室目前有以下4台冰箱:

• 4度透明冰箱: 


​ 主要放置RNase-free water、Trizol、ethanol等试剂 


​ DNA marker、loading buffer等电泳相关试剂 


​ Qubit、AMPure beads等kit 


• -20度冰箱 


​ 第一层:Geng Sisi 


​ 第二层:Zhang Shang 


​ 第三层:Xing Shaozhen 


​ 第四层:Wang Siqi 


​ 第五层:Wang Hongke 


​ 第六层:public reagent 


​ 第七层:Ice box、Ice pack 


• -80度冰箱(3305房间) 


​ 第一列:协和样本 


​ 第二列:北医肠癌、胃癌、肺癌样本 


​ 第三列:正常人、肝癌样本 


​ 第四列:红科试剂 


​ 第五列:思琦试剂 


​ 最下层:干冰、已离开人员的试剂及样本 


• 4度/-20度组合冰箱(暂时关闭) 


5. 实验室仪器预约&试剂订购

1)实验室内部仪器预约

• 针对使用情况,以下两台实验室内部仪器需要预约:


​ RNA超净台


​ PCR仪


需至少提前一天进行预约,在预约表上登记使用时间、使用人,必要时,可多人协调同时使用。

2)实验平台仪器预约

• qPCR仪、超高速离心机、大型显微镜等仪器需提前在校内仪器共享服务平台预约


预约链接:http://yqgx.tsinghua.edu.cn/webSite/websiteAction.do?ms=goToIndex

3)实验室试剂耗材采购途径

目前,实验室试剂耗材主要在以下两个平台采购:

• 清华大学试剂材料info管理系统

采购链接:http://mass.tsinghua.edu.cn/chem/www/index.php/Loginout/Index/login.html


• 供应室平台采购链接:http://www.gongyingshi.com/index/area-index


• 如需购买试剂/耗材,应先与实验室管理员联系,获得购买权限;选定待采购物品后下单,并联系实验室管理员审批。


• 超过1,000元的试剂/耗材需要事先向实验室负责人(鲁老师)邮件请示,注明试剂名称、用途、价格、详情链接,并抄送实验室管理员,待老师同意后才可购买。


注意: 试剂/耗材采购均有一定的货期,请计划好实验,提前购买。 实验室每月的值班人应定期检查常用试剂/耗材情况,及时购买与补充。 对于货期较长的试剂,任何人在使用时发现余量不足1/3时,应及时联系值班人或该试剂盒负责人,提前购买,避免影响实验

6. 值日安排

实验室成员每两周轮班值日:

负责人 日期
邢少贞 3.4-3.17
王红科 3.18-3.31
王思琦 4.1-4.14
胡茜 4.15-4.28
徐运昕 4.29-5.12
张尚 5.13-5.26

值日生职责:

• 购买实验室常用耗材,如手套、口罩、枪头、EP管、擦拭纸、去离子水等


• 实验试剂不足1/3时请及时购买或联系该试剂指定负责人购买


• 根据情况,每周最少两次处理生物垃圾安全袋(工作日上午9:00之前,将生物废弃物垃圾袋上标明实验室和日期,放置于实验室门口处)


• 根据使用情况,对枪头、离心管灭菌


• 值日第二周的周末,清洗实验服、对实验室进行紫外消毒


• 每晚检查各仪器设备是否关机、冰箱门是否紧闭


• 每晚离开前检查仪器是否关闭,并关灯、关空调、关窗锁门


• 实验仪器故障时,联系仪器指定负责人报修实验仪器设备


• 督促大家保持实验台的干净整洁,养成良好实验习惯


7. 实验室管理报告

​ 为保持实验室的整洁、确保实验顺利、促进大家成良好的实验习惯,值日生完成两周的值日后,需要在每两周的周一上午,进行值日总结报告,并Email给lulab组。

​ 包含值日报告、提醒&通报、建议等内容,帮助大家互相监督、共同进步。

1)值日报告

值日报告需要包含以下内容: 


检查点 完成度/完成次数
实验服清洗 [x]
实验室紫外消毒 [x]
提醒并检查实验记录本 [x]
RNA超净台清理
高压灭菌
生物安全袋处理
常用耗材购买 xx.xx:枪头xx盒
常用试剂购买 xx.xx:酒精xx瓶
实验室设备维修情况

2)提醒

总结邮件中,还应包含过去两周内不当行为的提醒,包含但不限于以下内容: 


日期 实验台/仪器/个人 不当行为
xx.xx XXX RNA超净台物品随意拿进/出
xx.xx XXX RNA超净台废液缸未处理
xx.xx XXX RNA超净台移液枪未调零
xx.xx XXX 未穿实验服
xx.xx XXX 实验台台面脏乱

3)建议

值日总结报告邮件中,可以提出对湿实验室管理方面的建议。